厭氧培養(yǎng)工作站用于微生物在厭氧(微氧)環(huán)境中的接種、連續(xù)培養(yǎng)、傳代,培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換和觀察、鑒定等工作??梢钥刂蒲鯕鉂舛?,模擬體內(nèi)低氧環(huán)境,控制二氧化碳濃度,提供細胞生長的條件。由培養(yǎng)操作室、取樣室、氣路及電路控制系統(tǒng)、熔蠟消毒器等部分組成。厭氧培養(yǎng)工作站的厭氧環(huán)境形成:
1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
2.通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度;
3.操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示紙(封閉);
4.關緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗;
5.操作室內(nèi)*次置換(氮氣置換):
A.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
B.接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥1,使手套鼓起,關閉閥門1,然后扎緊袋口;
6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續(xù)三次氮氣置換。
7.操作室第四次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為N285%、H210%、CO25%)
A.調(diào)換氣路打開混合氣閥3進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關開閉排氣;
B.關掉混合氣體閥3,并打開閥5,使混合氣體經(jīng)過流量計,調(diào)整流量計,流量為每分鐘10ml左右;
C.混合氣體重復2-3次轉(zhuǎn)換,經(jīng)過上述過程,基本形成厭氧環(huán)境。
8.操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后打開美蘭指示紙觀察其變色,不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境;
9.開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。